Nanobodies als chaperonnes voor de kristallisatie van complexe biomedische targets. (FWOAL551)

Om de informatie die in steeds hogere snelheid vrijkomt uit de genoomprojecten optimaal te benutten voor biomedische doeleinden, is er nood aan gedetailleerde structurele en functionele informatie over de eiwitten die gecodeerd worden door de gesequeneerde open leesramen. Door de technische moeilijkheden die gepaard gaan met de experimentele behandeling van slecht oplosbare eiwitten, intrinsiek ongestructureerde eiwitten, membraaneiwitten en multi-proteïnecomplexen blijft de structuuropheldering van dergelijke, vaak medisch belangrijke eiwitten echter achter. Een van de belangrijke ontdekkingen in onze onderzoeksgroep was het bestaan van volledig functionele antilichamen zonder lichte ketens in Camilidae, die hun antigenen binden via één enkel variabel domein, het VHH domein of de Nanobody (Nb). In de voorbije jaren werd reeds de proof of principle geleverd dat Nanobodies gebruikt kunnen worden als kristallisatie-chaperonnes voor de structuuropheldering van intrinsiek ontvouwen eiwitten en voor de studie van het mechanisme van amyloid vormende eiwitten.

Met van het huidige project willen we de unieke eigenschappen van de Nanobodies verder gaan aanwenden als hulpmiddel bij de productie, de zuivering, de kristallisatie en de functionele karakterisering van vertegenwoordigers van elk van de hierboven vermelde eiwitgroepen, waarvan de experimentele studie bepaalde specifieke technische moeilijkheden met zich meebrengt: GPCRs, MDRs, IDPs, protein-protein complexen en aggregerende eiwitten.

Trefwoorden:Applied Biology

Disciplines:Biologische wetenschappen