Replic-ON project – Baanbrekend onderzoek naar electroporatie met zelf-amplificerend boodschapper RNA als methode voor langdurige ex vivo transfectie van immuuncellen.

Recentelijk is er toenemende belangstelling voor het gebruik van zelf-amplicerend mRNA (saRNA) in therapeutische vaccins voor infectieziekten en kanker. SaRNA is een type boodschapper-RNA (mRNA) dat de niet-structurele eiwitten (nsP1-4) van een alfavirusreplicase bevat dat de oorspronkelijke streng mRNA kopieert wanneer het in de cel wordt gebracht. Het nsP1-4-replicon wordt gevolgd door een subgenomische promotor en de sequentie van een gen van belang, waardoor de expressie van eiwitten van belang in de gastheercel mogelijk wordt. De zelfreplicerende eigenschap houdt in dat de in het getransfecteerde saRNA gecodeerde eiwitten van belang langer tot expressie zullen komen dan conventioneel mRNA. Aangezien er echter geen integratie in het genoom van de gastheercel plaatsvindt, wordt insertiemutagenese voorkomen. Aldus combineren op saRNA gebaseerde strategieën het beste van stabiele virale of niet-virale en voorbijgaande op mRNA gebaseerde engineeringstrategieën. SaRNA wordt gewoonlijk in vivo toegediend als "naakt" saRNA met of zonder intradermale elektroporatie of geformuleerd in nanodeeltjesvaccins, waarmee de expressie van het betrokken eiwit 28 dagen kan duren. Het gebruik van deze technologie voor ex vivo modificatie van T-cellen in een therapeutisch product is tot dusver echter nog nooit onderzocht. De voornaamste doelstelling van het Replic-ON project is het onderzoeken van saRNA transfectie als een innovatieve technologie voor het genetisch manipuleren van immuuncellen in de context van de ontwikkeling van celtherapieën. Indien dit project slaagt, zal het baanbrekende gegevens opleveren voor de verdere ontwikkeling van ex vivo saRNA-transfectietechnologie als een geschikte benadering voor genetische T-cel-engineering in grotere toepassingen van fundamentele onderzoeksprojecten. Wij verwachten dat dit project de hoeksteen zal zijn voor de hoognodige ontwikkeling van efficiëntere en langdurige niet-integrerende cellulaire immunotherapieën, terwijl het de grens overschrijdt tussen kortlevende conventionele mRNA-technologieën en integrerende technologieën zoals virale transductie. Tenslotte zou dit baanbrekend onderzoek onze leidende positie inzake ex vivo op saRNA gebaseerde cellulaire therapieën binnen de onderzoeksgemeenschap consolideren.

Trefwoorden:T CYTOTOXISCHE LYMFOCYTEN, RNA, GENETISCHE MANIPULATIE, IMMUUNTHERAPIE

Disciplines:Hematologie, Toegepaste immunologie, Kankertherapie