Titel Deelnemers "Korte inhoud" "Proteolysis of systemic autoantigens and suppression of systemic autoimmunity by gelatinase B/MMP-9" "Bénédicte Cauwe" "Bij de mens omvat de familie van de matrix metalloproteïnasen (MMPs) 24verschillende neutrale endopeptidasen. Deze proteasen komen tussen infysiologische processen zoals reproductie, ontwikkeling, immuniteit enweefselherstel. Ontregeling van MMP activiteit heeft echter pathogene effecten bij kanker, inflammatie, vasculaire ziekten, neurodegeneratieve aandoeningen en auto-immuunziekten. Gelatinase B/MMP-9 wordt vooral gesecreteerd door macrofagen en neutrofiele granulocyten tijdens inflammatie, maar wordt ook geproduceerd door veel andere immuun- en kankercellen. Proteolyse van auto-antigenen door MMP-9 genereert immunodominante restepitopen voor auto-reactieve T cellen. Dit werdreeds aangetoond voor de klieving van collageen type II in reumatoïde artritis,van myelin basic protein en αB-crystalline in multiple sclerose, en vaninsuline in diabetes type I. Bovendien bleken MMP-9-deficiënte muizen minder gevoelig voor het ontwikkelen van symptomen in diermodellen van deze orgaanspecifieke auto-immuunziekten. Bijgevolg werd de vraag gesteld of MMP-9 ook systemische auto-antigenen kan klieven en hoe dit de ontwikkeling van systemischeauto-immuniteit zou beïnvloeden.Orgaan-specifieke auto-immuniteit is meestal gericht tegen een beperktaantal auto-antigenen die voorkomen in het aangetaste orgaan. Systemischeauto-immuunziekten worden daarentegen gekenmerkt door een breed spectrum aanauto-antigenen, vooral bestaande uit veel voorkomende intracellulaire eiwitten.Systemische lupus erythematosus of SLE is het type-voorbeeld van eensystemische auto-immuunziekte en wordt gekenmerkt door hoge titers vanauto-antistoffen tegen meer dan 100 verschillende intracellulaire and intranucleaireauto-antigenen. De vorming en afzetting van immuuncomplexen veroorzaaktinflammatie en weefselschade over het hele lichaam en tast vooral huid, nieren,gewrichten, longen, centraal zenuwstelsel en bloedvaten aan. In SLE veroorzaken genetische en omgevingsfactoren (bv. virale infecties, medicatie, toxines) een toename vanapoptose of geprogrammeerde celdood. Bovendien zijn verschillende mechanismenvoor het opruimen van apoptotische cellen verstoord. Bijgevolg zal de overmaat aan apoptotische cellen leiden tot secundaire necrose en openbarsten. Hierdoorworden intracellulaire eiwitten vrijgesteld in het extracellulair milieu, waar ze kunnen gemoduleerd worden door MMPs en andere proteasen, hetgeen een extra argument vormt voor de studie van MMP-9 in systemische auto-immuniteit.Om te bepalen of MMP-9 in staat is om systemische auto-antigenen teklieven, werd een systematische karakterisatie van het intracellulairesubstraatrepertoire of degradoom van MMP-9 opgestart aan de hand van een1-dimensionele degradomics methode. Om het necrotisch vrijstellen van intracellulaire eiwitten in SLE na te bootsen, werd een modelsysteem gebruikt van necrotische humane monocytische THP-1 cellen,met of zonder toevoeging van geactiveerd MMP-9. Op deze manier werd adenylyl cyclase-associated protein-1 of CAP1 geïdentificeerd als een nieuw enuitzonderlijk efficiënt substraat van MMP-9. CAP1 is een cytoskeleteiwit en een auto-antigeen in reumatoïde artritis en SLE. Bovendien, detecteerden we intact CAP1 in urines van patiënten met systemische auto-imuunziekten zoals SLE, Sjögrens syndroom en vasculitis, en in urines van gezonde personen. Verder werden geactiveerde vormen van MMP-9 teruggevonden in urinestalen van patiënten met klinische parameters van nierfalen, terwijl in urines van personen zonder nierziekte geen actief MMP-9 aanwezig was. Bovendien, werd in sommige urines van patiënten een omgekeerde relatie teruggevonden tussen de niveaus van intact CAP1 en van geactiveerd MMP-9, hetgeen suggereert dat CAP1 in vivo wordt afgebroken.Identificatie van bijkomende substraten was door de complexiteit van heteiwitmengsel niet mogelijk met een 1-dimensionele aanpak. Om op grotere schaalintracellulaire MMP-9 substraten te kunnen identificeren, werd eenvoudige engoedkope multidimensionele degradomics technologie ontwikkeld. Dezemultidimensionele methoden reduceren de complexiteit van het proteïnemengseldoor de eiwitten eerst te scheiden volgens hun netto-lading of isoëlektrischpunt met behulp van ionenuitwisselingschromatografie en vervolgens in eentweede dimensie volgens moleculair gewicht met behulp van SDS-PAGE encentrifugale filtratie. Toepassing van de multidimensionele degradomics technologie op THP-1 cytosol leidde tot de isolatie en visualisatie van ongeveer 200 kandidaatsubstraten waarvan een 70-tal geïdentificeerd werden m.b.v. tandem massaspectrometrie (MS/MS). Ongeveer 2/3 van deze kandidaatsubstraten was reeds bekend als auto-antigeen in verschillende auto-immuunziekten en kankers. Ook werden talrijke intracellulaire matrix eiwitten, zoals actine en tubuline, geïdentificeerd als nieuwe substraten van MMP-9. Deze resultatentoonden aan dat proteolyse van systemische auto-antigenen wel degelijk eenfunctie van MMP-9 kan zijn. Bovendien leidden deze data tot de suggestie dat proteolyse door MMP-9 vereist zou kunnen zijn om de overmaat aan toxische, immunogene intracellulaire (matrix) eiwitten en systemische auto-antigenen op te ruimen die worden vrijgesteld na extensieve necrose.Om de rol van MMP-9 in systemische auto-immuniteit in vivo te onderzoeken, werden muizengegenereerd die genetisch deficiënt zijn in MMP-9 en met de inactiverende lpr (lymfoproliferatie) mutatie in de apoptose-inducerende receptor Fas. C57Bl/6 muizen zonder functionele Fas receptor (B6lpr/lpr muizen) ontwikkelen matige lymfoproliferatie enchronische systemische auto-immuniteit op latere leeftijd en met weinigimmunopathologie. De additionele genetische knockout van MMP-9 in B6lpr/lpr muizen resulteerde echter in een versnelde en sterk toegenomen lymfoproliferatie met uitgesprokenlymfadenopathie en splenomegalie, en significant gereduceerde overlevingvergeleken met enkel deficiëntie van Fas. Bovendien leidde het ontbreken van MMP-9 in B6lpr/lpr muizen tot een verhoogde productie van auto-antistoffen tegen multipele auto-antigenen en tot meer uitgesproken auto-immune weefselschade. Vermits intacte auto-antigenen betere stimuli bleken te zijn voor auto-antilichaamproductie, zou de onderdrukking van lpr-geïnduceerde systemische auto-immuniteit een gevolg kunnen zijn van de opruiming van immunodominante T- en B-cel epitopen in auto-antigenische substraten. Bijgevolg zou het ontbreken van MMP-9-gemedieerde proteolyse tot een bijkomend defect in opruiming kunnen leiden, hetgeen de ontwikkeling van systemische auto-immuniteit kan versnellen en bestaande auto-immuunreacties kan amplificeren.We kunnen dus besluiten dat MMP-9 een uitgebreid spectrum aan intracellulaire (matrix) proteïnen en systemische auto-antigenen kan klieven. Opruiming van intracellulaire eiwitten zou cruciaal kunnen zijn om immuuntolerantie te behouden na acute of chronische necrose, zoals voorkomendbij SLE. Bovendien werd MMP-9 geïdentificeerd als een beschermende factor ineen in vivo model van systemische auto-immuniteit. Deze pre-klinische studies hebben medische implicaties. Verschillende studies stellen immers voor om MMP remmers te gebruiken in SLE en andere systemische auto-immuunziekten. Onze data suggereren echter datmen voorzichtig moet omspringen met de studie van MMP inhibitie bij SLE, aangezien hierdoor systemische auto-immuunreacties kunnen ontstaan of geamplificeerd worden in patiënten met een ongunstige genetische achtergrond." "Lpr-induced systemic autoimmunity is unaffected by mast cell-deficiency" "Annemarie van Nieuwenhuijze, Bénédicte Cauwe, Stephanie Humblet-Baron, Adrian Liston" "The function of mast cells in allergic and organ-specific autoimmune responses is highly controversial. In the current study we aimed to dissect the role of mast cells in systemic autoimmunity in the B6(lpr/lpr) mouse, a spontaneous model of systemic lupus erythematosus. B6(lpr/lpr) mice were interbred with C57Bl/6-Kit(W-sh/W-sh) (Wsh) mice, resulting in mast cell-deficiency. The offspring from this cross (Lpr/Wsh mice) developed symptoms of lupus of the same severity as B6(lpr/lpr) mice. Loss of mast cells on the Lpr background did not alter autoantibody production, proteinuria, the composition of T and B cell populations or autoimmune pathology. Reduced c-Kit expression did drive expanded splenomegaly and impeded IL-4 production by by CD4(+) cells, suggesting minor functions for mast cells. In general we conclude that mast cell deficiency and c-Kit deficiency do not play a role in the pathogenesis of lupus in B6(lpr/lpr) mice.Immunology and Cell Biology accepted article preview online, 07 April 2015. doi:10.1038/icb.2015.49." "Effect of Impaired T Cell Receptor Signaling on the Gut Microbiota in a Mouse Model of Systemic Autoimmunity." "Dirk Elewaut" "Long-Term MALT1 Inhibition in Adult Mice Without Severe Systemic Autoimmunity." "Annelies Demeyer, Ioannis Skordos, Dirk Elewaut, Jens Staal, Rudi Beyaert" "The Ubiquitin-Editing Protein A20 Prevents Dendritic Cell Activation, Recognition of Apoptotic Cells, and Systemic Autoimmunity" "Geert Van Loo, Wim Waelput, Sofie De Prijck, Sophie Janssens, Dirk Elewaut, Rudi Beyaert, Hamida Hammad, Bart N Lambrecht" "Lpr-induced systemic autoimmunity is unaffected by mast cell-deficiency" "Annemarie van Nieuwenhuijze, Bénédicte Cauwe, Denise Klatt, Stephanie Humblet-Baron, Adrian Liston" "Interphotoreceptor retinoid binding protein as biomarker in systemic autoimmunity with eye inflictions" "Francis J Descamps, Dustan Kangave, Bénédicte Cauwe, Erik Martens, Karel Geboes, Ahmed Abu El-Asrar, Ghislain Opdenakker" "Autoimmune diseases of the eye, exemplified by Behçet disease and Vogt-Koyanagi-Harada disease, are a major cause of blindness. We studied interphotoreceptor retinoid binding protein (IRBP), a dominant autoimmune antigen in the eye. Aqueous humor samples from 28 patients with active uveitis were analysed for immunoglobulin G (IgG) content as a marker for blood-ocular barrier breakdown and by gelatinase B zymography for the detection of inflammation. The data were correlated with the presence of intact IRBP ( asymptotically equal to 140 kD) as determined by Western blot analysis and with the clinical disease activity. Aqueous humor samples from control eyes and eyes with low disease activity showed positive immunoreactivity for intact IRBP. The IRBP signal weakened or disappeared with higher disease activity. Significant positive correlations were observed between disease activity and levels of matrix metalloproteinase-9 (r(s)= 0.713; p" "Interphotoreceptor retinoid-binding protein as biomarker in systemic autoimmunity with eye inflictions" "Bénédicte Cauwe, Karel Geboes, Ghislain Opdenakker" "Autoimmune diseases of the eye, exemplified by Behçet disease and Vogt-Koyanagi-Harada disease, are a major cause of blindness. We studied interphotoreceptor retinoid binding protein (IRBP), a dominant autoimmune antigen in the eye. Aqueous humor samples from 28 patients with active uveitis were analysed for immunoglobulin G (IgG) content as a marker for blood-ocular barrier breakdown and by gelatinase B zymography for the detection of inflammation. The data were correlated with the presence of intact IRBP ( asymptotically equal to 140 kD) as determined by Western blot analysis and with the clinical disease activity. Aqueous humor samples from control eyes and eyes with low disease activity showed positive immunoreactivity for intact IRBP. The IRBP signal weakened or disappeared with higher disease activity. Significant positive correlations were observed between disease activity and levels of matrix metalloproteinase-9 (r(s)= 0.713; p" "Immune system activation in polymyalgia rheumatica : which balance between autoinflammation and autoimmunity? A systematic review" "Elvis Hysa, Emanuele Gotelli, Silvia Sammorì, Marco Amedeo Cimmino, Sabrina Paolino, Carmen Pizzorni, Alberto Sulli, Vanessa Smith, Maurizio Cutolo" "Background and aim: Polymyalgia rheumatica (PMR) is an inflammatory rheumatic disease that is common in elderly people. Its classification in the spectrum of autoinflammatory and autoimmune diseases is difficult because of its only partially understood immune-mediated mechanisms. The literature concerning the innate and adaptive immune system activation in PMR was systematically reviewed highlighting the relative weight of autoinflammation and autoimmunity in its pathogenesis and disease progression.Methods: A literature search on PubMed Central and Embase scientific databases was performed by two independent reviewers. To be eligible, the studies needed to fully satisfy our initial PICO framework: a primary diagnosis of PMR as a population, the search for immune/inflammatory cells, cytokines and autoantibodies as an intervention, a control group consisting in healthy controls, patients with other inflammatory rheumatic diseases or PMR patients in remission after treatment and as outcomes the results of the investigations in the analyzed tissue samples. The most relevant data of the included papers were extracted by using a standardized template.Results: Of the 933 screened abstracts, 52 papers were included in the systematic review and categorized depending on their primary research objectives.The hyper-activity of neutrophils and monocytes, expressing toll-like receptor 7 in active disease, an impaired phagocytosis and endothelial dysfunction, as well as an increased count of innate T cells in patients with remission emerged among the major derangements of the innate immune response in PMR. Among the cytokines profile, interleukin-6 plays a key role but other pro-inflammatory mediators and angiogenesis markers such as chemokines, B-cell activating factor, vascular endothelial growth factor and angiopoietins seem to be involved in refractory or glucocorticoid-resistant PMR.The aberrant adaptive immune response was documented by tissue and serum findings of polarized T cells towards T helper 1 and 17 phenotypes, an increased expression of immunosenescent surface markers and a downregulated immunoregulatory response. The altered distribution of peripheral B cells, detected during active disease, suggested their peripheral migration towards unidentified sites. The interaction between innate and adaptive immune response was documented by a synovial infiltrate of macrophages and T cells. Despite multiple autoantibodies have been detected in PMR patients, none proved to correlate with disease activity seeming to be reactive to the marked inflammation or antigenic determinants provided by environmental triggers or tissue/cell damage. Conclusions: The complex network between innate and adaptive immune system in PMR is supported by findings at molecular and cellular levels. By considering both the ends of the pathophysiological spectrum of immune mediated rheumatic diseases, PMR may be regarded as an inflammatory immune-mediated disease with mixed mechanisms in a background of genetic and epigenetic factors together with immunological and endocrine senescence." "Thyroid Autoimmunity and Intracytoplasmic Sperm Injection Outcome: A Systematic Review and Meta-Analysis" "Kris Poppe, Candice Autin, Flora Veltri, Pierre Kleynen, Lidia Grabczan, Serge Rozenberg, Lieveke Ameye" "Background: Since 2010, three meta-analyses have been published on the impact of thyroid autoimmunity (TAI) on pregnancy outcomes in infertile women treated with assisted reproductive technology (ART). The initially observed high risk of miscarriage became very low in the most recent meta-analysis published in 2016. Objective: To investigate whether the lower risk of miscarriage in the latest meta-analysis was associated with the increased use of intracytoplasmic sperm injection (ICSI) in recent studies. Data source: MEDLINE was searched from January, 1990, to May, 2017. Study selection: Data from case-control and cohort studies, on ART (IVF/ICSI) pregnancy outcomes in women with and without TAI. Only studies were included in which women were treated with ICSI. Data extraction and synthesis: Four studies were retained including 1855 ICSI cycles (290 with and 1565 without TAI). In women with a clinical pregnancy (114 ICSI cycles with TAI and 651 without), there was no difference in miscarriage or live birth rates: respective combined OR 0.95 (95% CI, 0.48 to 1.87) and 1.12 (95% CI, 0.62 to 2.03). There was no difference in age in women with and without TAI: combined mean difference of 0.13 years (95% CI, -0.51 to 0.76), but serum TSH was higher in women with TAI: combined mean difference of 0.20 mIU/L (95% CI, 0.07 to 0.33). Conclusion: Infertile women with TAI treated with ICSI had no increased risk of a first trimester miscarriage compared with women without TAI."