Studie van endocytosis, transcytosis and kernlokalisatie van varkens lactoferine in mini-darmen en ontwikkeling van slim lactoferrine door lactoferrine via nanolichamen te richten naar intestinale Chlamydia suis en zijn virulentie factoren

Chlamydia suis is een gram-negatieve obligaat intracellulaire bacterie. C. suis is een opkomend varkenspathogeen dat economische verliezen veroorzaakt in de varkensvleesindustrie. De focus van ons voorstel ligt op het voorkomen van intestinale C. suis bij varkens aangezien: i) de darm fungeert als een C. suis reservoir, ii) C. suis en vnl. tetracycline resistente C. suis, economische schade veroorzaakt en preventie is er niet en iii) C. suis een zoönose is. Onze hypothese is dat intestinale C. suis infecties kunnen voorkomen worden door de antibacteriële en immunomodulerende capaciteit van porcine LF (pLF), een eiwit van het aangeboren immuunsysteem. Om dit te ondersteunen, zullen we eerst receptorgemedieerde endocytose en biodistributie van pLF in varkens enteroïden bestuderen, evenals de pLF geactiveerde signaalroutes in enteroïden. We kunnen de antibacteriële capaciteit van pLF zelfs verhogen door nanobody-gemedieerde targeting van pLF naar de buitenste membraan van chlamydia of het Type 3 secretiesysteem (T3SS). Nanobodies zijn enkel-domein antilichaamfragmenten afkomstig van het variabele deel van de zware keten van kameelachtigen zware keten antilichamen. Nanobodies tegen de buitenste membraan van chlamydia en tegen het T3SS zullen worden gekoppeld aan pLF en gebruikt worden tegen C. suis infecties in varkens enteroïden. Finaal zullen we het effect van deze slimme pLFs op intestinale C. suis bestuderen tijdens experimenten met dunne darmsegment perfusie bij SPF varkens.