< Terug naar vorige pagina

Project

P5 Type ATPase Atp13A2, een Parkinson geässocieerd gen, coördineert belangrijke communicatiemechanismen betrokken bij het onderhoud van kankercel proteostase

ATP13A2 (ook bekend als PARK9) is een transmembraan endo-/lysosomal-geassociaaerd P5 type transport ATPase. Een mutatie in ATP13A2 waarbij de functie wordt aangetast veroorzaakt een vorm van autosomale ziekte van Parkinson genaamd het syndroom van Kufor-Rakeb. Ondanks de groeiende belangstelling in ATP13A2 is er weinig bekend over diens fysiologische functie in gestreste cellen. Recent onderzoek suggereert dat het N-terminale domein van ATP13A2 belangrijk zou zijn voor enkele regulerende functies, maar op welke wijze is nog volledig onbekend. Daarom hebben wij enkele melanoma en neuroblastoma celllijnen ontwikkeld die varianten van ATP13A2, waaronder ‘wild-type’ (WT), katalytisch inactief (D508N) en een N-terminus mutant, of een shRNA tegen ATP13A2 stabiel tot expressie brengen. We hebben ontdekt dat bij behandeling van deze cellen met de proteasoomremmer Bortezomib (waardoor een zogeheten proteotoxische stress wordt geïnduceerd) zowel de WT, D508N als de N-terminus gemuteerde variant van ATP13A2 de intracellulaire accumulatie van ubiquitine-geconjugeerde (Ub) eiwitten verlaagd, onafhankelijk van autofagie-gerelateerde afbraak. Daarentegen, verlaging van ATP13A2 expressie (middels shRNA) verhoogt juist de accumulatie van Ub-eiwitten. Dit phenomeen is ook waargenomen in fibroblasten van patienten met een aangetaste ATP13A2 functie. In de behandelde cellen zorgde ATP13A2 voor verplaatsing van endosomale blaasjes en verhoogde de uitvoer door nanoblaasjes. De expressie van een ATP13A2 mutant die PI(3,5)P2 niet kan binden of de chemische remming van het PI(3,5)P2-producerende enzym PIKfyve tastte de beweging van/uitvoer door nanoblaasjes aan en herstelde de intracellulaire opeenstapeling van Ub-eiwitten na proteasoomremming. Dus onze studie demonstreert een nieuwe, activiteits-onafhankelijke rol van ATP13A2 in de verplaatsing/uitvoer van intracellulaire lading tijdens proteotoxische stress.  

Datum:1 okt 2012 →  16 okt 2017
Trefwoorden:stress-autophagy
Disciplines:Morfologische wetenschappen, Oncologie
Project type:PhD project