Ontrafeling van het antifungaal werkingsmechanisme van plantdefensinen.

Plantdefensinen zijn kleine, basische peptiden (< 5 kDa) met antimicrobiële activiteit, die deel uitmaken van de aangeboren afweer ('innate immunity') van planten tegen pathogene schimmels en bacteriën. In het voorgestelde project zullen we ons toespitsen op de verdere ontrafeling van het antifungaal werkingsmechanisme van plantdefensinen uit Raphanus sativus (RsAFP2), Dahlia merckii (DmAMP1) en Heuchera sanguinea (HsAFP1). Bovenvermelde plantdefensinen induceren membraan-permeabilisatie na interactie met specifieke bindingsplaatsen in de plasmamembraan van gevoelige schimmel- en giststammen. In het geval van RsAFP2 en DmAMP1 werden deze bindingsplaatsen in het gistmembraan geïdentificeerd als sfingolipiden, nl. glucosylceramides (GlcCer) . De bindingsplaatsen voor HsAFP1 in het schimmelmembraan konden tot op heden nog niet geïdentificeerd worden. We zullen in het huidige project nagaan of de verschillende plantdefensinen apoptose induceren in gist door kwantificatie van intracellulair ROS (d.m.v. DCFHDA fluorescentie), de graad van chromosoom-breking (d.m.v. TUNEL fluorescentie) en phosphatidylserine flip-flop (d.m.v. Annexin-FITC fluorescentie).

Trefwoorden:Plant defensins

Disciplines:Microbiologie, Systeembiologie, Laboratoriumgeneeskunde