< Terug naar vorige pagina

Project

LOKALISATIE EN REGULATIE VAN GAMMA-SECRETASE IN CILIOGENESE: IMPLICATIES IN GEZONDHEID EN ZIEKTE

SAMENVATTING</>
Cilia project van het oppervlak van de meeste gewervelde cellen, en zijn belangrijk voor verschillende fysiologische en ontwikkelings processen. Ciliaire gebreken zijn gekoppeld aan een grote verscheidenheid van ziekten bij de mens, met de naam ciliopathies, onderstrepen het belang van het begrip signaling pathways betrokken bij cilia vorming en onderhoud. Hier laten we zien dat Rer1p, een eiwit kwaliteitscontrole receptor die woonachtig zijn in het compartiment ER Golgi betrokken is bij het reguleren van de structuur en functie van cilia. Zowel in de zebravis en cellen van zoogdieren, verlies van Rer1p resulteert in het verkorten van de cilium en bijzondere waardevermindering van zijn motile en/of zintuiglijke functie. Cilia vorming is belangrijker, ook in cellijnen afgeleid van monosomie 1p36 patiënten, waaraan een terminal chromosomale verwijdering dat het RER1 gen omvat gecompromitteerd. Een substantieel deel van de patiënten klinisch beeld waaronder gehoorproblemen,aangeboren hartafwijkingen en gezicht deformiteit Ciliaire disregulatiesuggereert, en in zebrafish kan worden geïmiteerd door knockdown van Rer1p. We laten zien verder dat Rer1p ciliogenesis mede door zijn functie controleert bij het reguleren van negatief γ-secretase activiteit en de signalering van ten minste een van zijn substraat, Notch, als nanomolar concentratie van een inhibitor γ-secretase gedeeltelijk maar aanzienlijk gered cilium lengte in cellen Rer1p uitgeput. Downregulatie Rer1p resulteert in een gebrek aan evenwicht in de cilia onderhoud en daarom functie die wordt weerspiegeld door verminderde Hedgehog signalering. We identificeren daarom Rer1p als de eerste ER-Golgi gelokaliseerde membraan eiwit betrokken bij ciliogenesis waar het oefent deze bredere fysiologische functie in cellen en in vivo modellen door middel van regulering van de vergadering en de activiteit van γ-secretase. Handelend via de controle van ciliogenesis, kan Rer1p dus spelen een centrale rol bij te dragen tot de klinische symptomen van Monosomie 1p36, herkennen als een onderliggende ciliopathy. γ-secretase iseen multimeric die verantwoordelijk zijn voor de proteolytic verwerkingvan ongeveer 90 verschillende integraal membraaneiwitten eiwit complex.De diverse functies van γ-secretase zijn derhalve bij het splijten van de verschillende substraten en de daaropvolgende signalering eigenschappen gekoppeld toegewezen. Zijn
106
betrokkenheid bij een biologisch belangrijk proces zoals ciliogenesis dus verzocht ons om te verkennen zijn verantwoordelijk voor dit proces effectoren. Ondanks de alomtegenwoordige bestaan en echte fysiologische belang blijft de samenstelling van eiwit van cilia slecht onderzocht. Dus, we eerst een benadering van proteomics gebruikt voor het toewijzen van het eiwitgehalte van geïsoleerde cilia; gelokaliseerde γ-secretase substraten specifiek om nieuwe cilia vast te stellen. Dus, hier we laten zien voor de eerste keer dat Amyloid voorloper eiwit (APP) en APP zoals eiwit 2 (APLP2) zijn gelokaliseerd op de primaire cilium. APP speelt een centrale rol in de pathogenese van de ziekte van Alzheimer: APP verwerking genereert β-amyloid (Aβ) peptides, die zijn gedeponeerd in amyloïde plaques in de hersenen van de ziekte van Alzheimer-patiënten. Ondanks intensief onderzocht, blijft nog steeds de volle omvang van de fysiologischerol van APP raadselachtige. Met behulp van verschillende cel biologische benaderingen, wij laten zien dat APP proteolytically is verwerkt in decilium en dat haar sheddases, ADAM10 en γ-secretase complex zijn gelegen in de cilium, alsmede voor het onderhoud van goede cilia lengte. Knockout van APP samen met APLP2 leidt tot korte cilia die kon worden gered door de stabiele herexpressie van volledige lengte / carboxy terminal fragment van APP (APP-CTF) maar niet de APP intracellulaire domein (AICD). Verder laten we zien dat APP-CTF cilia lengte door het activeren van het cyclisch AMP/proteïne Kinase A signalering traject regelt, waarmee voor het eerst de eis van APP verwerking als een roman regelgever in cilia lengte onderhoud.
Datum:22 jun 2009 →  4 jun 2013
Trefwoorden:Cargo receptor Rer1p
Disciplines:Genetica, Systeembiologie, Moleculaire en celbiologie
Project type:PhD project