Forward genetic screening om nieuwe spelers te ontdekken in (lymf-)angiogenese.

Ondanks de vooruitgang op het gebied van (lymfe)-angiogenese blijft onze kennis over hoe (bloed)vaten groeien en contact maken, en hoe endotheelcellen (EC) in (bloed)vaten gespecificeerd worden, beperkt. Inzicht in deze processen is van cruciaal belang voor de ontwikkeling van nieuwe anti-angiogene therapieën. Omdat patronen en connectiviteit van endotheelnetwerken gedurende evolutie behouden zijn gebleven, kunnen algemene vormingsmechanismen in vertebrate modellen bestudeerd worden. In dit project stellen wij een hoge doorvoer forward mutagenese screening in zebravissen voor, dit om nieuwe spelers in (lymf)-angiogenese te identificeren. Hierbij zal gebruik worden gemaakt van een transgene lijn die alle EC labelt in het ontwikkelende embryo. We zullen mutante zebravislijnen genereren door middel van chemische mutagenese, deze zullen in een derde generatie gescreend worden voor (recessieve) mutaties met een vasculair of lymfatisch fenotype. Vervolgens zullen we gemuteerde genen identificeren met behulp van microsatelliet, SNP-merker analyzes en sequencing. Ten slotte zullen we geïdentificeerde mutaties verifiëren en valideren en deze geïdentificeerde genen karakteriseren. Om onze kennis over (bloed)vat vertakking en de functie van de nieuwe geïdentificeerde genen te verbeteren, zullen nieuwe transgene reporterlijnen ontwikkeld worden. Deze lijnen merken selectief verschillende endotheliale fenotypes bij het ontstaan van een nieuw (bloed)vat.

Trefwoorden:Pro-anti-angiogenic strategies, (Lymph-)angiogenesis, Forward genetic screening

Disciplines:Dierkundige biologie, Diergeneeskunde, Fysiologie, Biochemie en metabolisme, Medische biochemie en metabolisme