< Terug naar vorige pagina

Project

Beknotten gelsoline amyloïdvorming in een transgeen muismodel door middel van chaperonne nanobodies

Familiaire amyloïdose van het Finse type (FAF) is een autosomaal dominant erfelijke amyloïde ziekte. Bij menselijke patiënten, amyloïde afzettingen boog in de huid, hoornvlies, bloedvatwanden peritoneum en gezichtszenuwen. Klinische kenmerken zijn peri wilde neuropathie invloed zijn op de hersenzenuwen, corneadystrofie, Clllis / cua, nieren en Hean mislukking. Er is een kleine CNS betrokkenheid (lichte verslechtering van het geheugen, aantasting van visueel-ruimtelijke en bouwkundige vermogens). Amyloïde fibrillen afkomstig van het uitgescheiden eiwit actine bijbehorende ge / solin. FAF wordt veroorzaakt door een enkele puntmutatie (Asp 187 tot Tyr of Asn). Dit veroorzaakt verlies van calcium binding door gc1solin domein 2. Hierdoor furine (a Ca2 + afhankelijke serine endoprotease) proteolytisch verwijdert een N-eindstandige segment van gelsoline tijdens de transpon in Irans Goigi netwerk, waardoor een 68 kDa C-terminaal fragment (C68) (Figuur IA). Na afscheiding van C68, de matri !, metalloprotcasc MTI-MMP katalyseert de tweede proteolytische splitsing van gclsolin gevolg de vorming van 8 en 5 k Da gclsolin peptiden die spontaan associëren in amyloïde fibrillen, verantwoordelijk voor de ziekte ontstaan ​​en de progressie. Een muismodel recapituleren de ziekte werd gepubliceerd door de groep van Dr. Kelly (Scripps Researeh Institute, USA). Een klassieke benadering voor het behandelen van dergelijke ziekten zouden remmers van furine of MMP-MTI USC. Gezien het chronische karakter (vele amyloïdziekten) zou dit zeer waarschijnlijk veroorzaakt ongewenste neveneffecten. We willen een andere strategie die ook voor andere amyloïdziekten, d.w.z. kan worden verlengd door gebruik nanobodies USC. We opgeheven verschillende Sels ofnanobodies tegen gc1solin met ter bescherming FAF mutant gelsoline tegen furine of MMP MTI-splitsing. Nanobodies boog de kleinste intacte antigeenbindende fragmenten van zware keten antilichamen aanwezig in serum ofCamelidae (figuur IB). Ze kunnen eenvoudig worden gekloond, expressie gebracht en gezuiverd. Ons werk heeft aangetoond dat gekozen gelsoline nanobodies gelsoline splitsing kan beschermen in vitro en in vivo. Het ontwikkelen van de eerste Nanobody transgene muis die ogenschijnlijk zal gelsoline beschermen tegen rurin aanval. Door hun unieke biofysische en farmacologische propenies, nanobodies vertegenwoordigen een veelbelovend instrument voor onderzoek, en de Arc idealiter suitcd om devclOP in een nieuwe klasse van thcrapcuties. Onze doelstellingen im: ludc: I) nanobody thcrapeutic clTecls in transgcnic dieren te onderzoeken, 2) nanobodics voor in vivo beeldvorming van amyloïde afzettingen USC 3) met een Nanobody ontwikkelen begiftigd een met een dubbele beschermende werking en 4) om de exacte lokaliseren bindingsplaats in gelsoline oFA nanobody dat protccts tegen MTI-MMP-activiteit. Derhalve richt de amyloïdogene substraten met nanobodies kan ontwikkelen tot een benadering bruikbaar in andere amyloïdziekten.

Datum:1 jan 2014 →  31 dec 2015
Trefwoorden:gelsolin amyloid formatie
Disciplines:Medische biochemie en metabolisme, Biochemie en metabolisme