ARF6-gemedieerde endocytose: de ontbrekende schakel van de gamma-secretase onafhankelijke rol van preseniline 1 in membraantransport in neuronen?

Naast de katalytische rol in gamma-secretase draagt preseniline 1 (PSEN1) ook bij tot calcium homeostase, apoptose en endosomaal transport. In PSEN1-/- hippocampale neuronen accumuleert ICAM-5 in degradatieve organellen wat een rol voor PSEN1 in endosomale sortering impliceert. Om deze bevinding verder te ondersteunen willen we deze endocytotische route verder karakteriseren. Onze eerste data suggereren de betrokkenheid van ARF6 in deze sorteringsdynamica. Dit leidde tot onze werkhypothese dat PSEN1 de ARF6-gemedieerde endosomale recyclage moduleert. Dit zal getest worden in co-lokalisatiestudies en live imaging van tagged eiwitten in combinatie met ARF6 transport blokkerende mutanten. Verder zullen we agonist- en groeifactor-geïnduceerde stimulatie van de ARF6 route gebruiken om ICAM-5 internalizatie te mediëren. Deze kennis zal ons toelaten om biogeconjugeerde superparamagnetische nanopartikels te genereren die ICAM-5/ARF6 positieve organellen als target hebben en die toelaten dergelijke endosoompopulaties te isoleren voor proteoomanalyse. Het ontrafelen van de endocytotische defecten in PSEN1-/- neuronen zal nieuwe regulatoren voor ARF6-regulatie identificeren alsook een kans tot nieuwe biomerkers die endo/lysosomale dysfuncties kan identificeren in sporadische AD.

Trefwoorden:Endosome, Hippocampal neuron, Presenilin

Disciplines:Systeembiologie, Medische biochemie en metabolisme, Biochemie en metabolisme, Microbiologie