Confocale en twee-fotonenmicroscoop (Nikon A1R-MP)

Confocale laserscanmicroscopie (CLSM) is een veelgebruikte techniek in de levenswetenschappen voor het maken van hoogwaardige beelden van biologische monsters. De monsters worden verlicht door een gerichte laserstraal die over het monster wordt gescand om fluorescerende markers te visualiseren. Emissie van elke positie wordt gedetecteerd door een puntdetector en een gaatje verwijdert onscherp emissielicht om het contrast en de resolutie te verbeteren. CLSM resulteert in optische sectioning en er wordt een 3D reconstructie van het monster gemaakt.
Twee-fotonenmicroscopie is beschikbaar op dit instrument dat gebruik maakt van een MaiTai Deep See lasereenheid. Twee-fotonenmicroscopie is voordelig voor diepe beeldvorming in dikke (levende) monsters en is een alternatief voor confocale microscopie. In dit type microscopie worden fluoroforen geëxciteerd met licht van een rood verschoven golflengte met de helft van de energie die nodig is voor één fotonexcitatie. De fluorofoor moet meerdere fotonen tegelijk absorberen. Deze gebeurtenissen kunnen alleen plaatsvinden bij hoge laserintensiteiten die kunnen worden bereikt in het brandpuntsvolume van een gepulseerde laser, waardoor onscherpe excitatie en fluorescentie worden geëlimineerd. Twee fotonenmicroscopie is voordelig voor optische secties in dikke monsters.

Specificaties:

· 4 lasers (405 nm, 488 nm, 561 nm, 640 nm)

· Galvos- en resonantie- scanner

· Perfect Focus Systeem

· 4 detectiekanalen (2 GaASP- en 2PMT-detectoren)

· 32-kanaals spectrale detectoreenheid

· Incubator met temperatuurregeling op microscoopniveau, CO2 en vochtigheid op celkweekniveau

· Multi-foton laser (Mai Tai TI: SAPPHIRE laser, 690-1040 nm)

· Niet-gedescande detectoren

· Objectief lenzen:

o 60X water met geautomatiseerde correctiering (SR plan apo IR 60X WI, NA 1.3, WD 180μm)

o 60X olie (plan apo λ 60X olie, NA 1.4, WD 130 μm)

o 40X lucht (plan apo λ 40X, NA 0.9, WD 250 μm)

o 20X lucht (plan apo VC 20X, NA 0.8, WD 1000 μm)