Vergelijking van het bewerken, aanvulling of vervanging van defecte RNA moleculen als een nieuwe behandelingsmethode vroege embryonale ontwikkelingsstilstand overwinnen

Een op de zeven koppels ondervindt reproductieve moeilijkheden. Zelfs na het ondergaan van geassisteerde voortplantingstechnologie, vertoont een subset van deze patiënten nog steeds problemen, waarbij stilstand optreedt van het zich ontwikkelende embryo tijdens de eerste celdelingen (embryo developmental arrest – EDA). Deze indicatie werd onlangs in verband gebracht met mutaties in maternale effect genen, wat impliceert dat defecte mRNA-moleculen in de eicel bijdragen aan het EDA. In dit projectvoorstel zullen we een relevant muismodel voor EDA ontwikkelen en dit gebruiken om drie technieken te vergelijken: correctie van deze defecte mRNA-moleculen , hun aanvulling met of hun vervanging door functionele moleculen. In een eerste reeks experimenten zullen we een recent ontwikkelde aanpassing van de CRISPR/Cas genoomwijzigingstechnologie gebruiken om gerichte modificatie van mutante mRNA-moleculen in de eicel mogelijk te maken tijdens de bevruchting. Ten tweede zullen we de minder gecompliceerde toediening van wild type complementair RNA of recombinante eiwitmoleculen onderzoeken. Als derde, onafhankelijke strategie zullen we het hele cytoplasma vernieuwen met behulp van de nucleaire transfer technologie. Na optimalisatie, evaluatie en vergelijking van deze drie strategieën wat betreft efficiëntie en veiligheid in een muismodel, is het uiteindelijke doel om de meest veelbelovende technieken verder te valideren bij patiënten met EDA, in een preklinische onderzoekscontext.