Studie van de biologische effecten van de glycosylering van het chemokine CCL2 en zijn receptor CCR2

Van posttranslationale modificaties zoals gelimiteerde proteolytische truncatie, nitratie en citrullinatie is bewezen dat ze de biologische activiteit van chemokinen beïnvloeden. CCL2 is een belangrijke attractant en activator van monocyten en een van de enige chemokinen waarvoor natuurlijke glycosylatie werd gerapporteerd. Recent werd ook voor chemokinereceptoren, die tot de G-proteïne gekoppelde receptorfamilie behoren, aangetoond dat ze beïnvloed worden door glycosylatie. Er zijn echter nauwelijks studies over de biologische effecten van CCL2 of CCR2 (de CCL2 receptor) glycosylatie. In samenwerking met de Universiteit van Kopenhagen zullen we onze expertisen in de biochemie en biologie van chemokineliganden met hun expertise in GPCR technologie en glycobiologie combineren. We zullen 1) onderzoeken of CCL2 of CCR2 glycosylatie celtype specifiek is, 2) de suikerstructuren identificeren, 3) methoden ontwikkelen om specifieke glycovormen van CCL2 en CCR2 te bepalen, 4) methoden ontwikkelen voor de kwantificatie van CCL2 glycovormen in celculturen en patiëntenstalen, en 5) de biochemische en biologische effecten van ligand- en/of receptorglycosylatie bestuderen. De biochemische and biologische testen omvatten: evaluatie van receptorbinding en glycosaminoglycaanbinding, stabiliteit, receptorsignaaltransductie, celmigratie in vitro en in vivo, etc. Dit project zal onze kennis in verband met de rol van glycosylatie in CCL2/CCR2 biologie vergroten en zal methoden aanreiken voor de studie van CCL2/CCR2 biologie in patiëntenstalen.