< Terug naar vorige pagina

Project

Mitotische functie en regeling van het fosfatase stellage-eiwit Repo-Man

Omkeerbare eiwitfosforylering is één van de meest voorkomende posttranslationele modificaties in eukaryoten. Het is een proces dat zeer strikt geregeld wordt door eiwitkinasen en fosfatasen. Deze regeling door omkeerbare fosforylering geldt ook voor Histon 3, één van de meest uitgesproken gefosforyleerde eiwitten tijdens mitose. Heel wat eiwitkinasen voor Histon 3 zijn reeds gekend en functioneel gekarakteriseerd, terwijl overde eiwitfosfatasen die H3 defosforyleren nauwelijks iets geweten is.
Wij hebben aangetoond dat PP1 het belangrijkste eiwitfosfatase is voorde defosforylering van de mitotische fosfosites van Histon 3 (ph): H3T3ph, H3S10ph, H3T11ph en H3S28ph. Bovendien hebben we Repo-Man geïdentificeerd als Histon H3T3ph targeting subeenheid voor PP1 en aangetoond dat het gevormde complex antagonistisch werkt aan het eiwitkinase Haspin. Overeenstemmend met deze bevinding toonden we aan dat het Repo-Man/PP1 complex de spreiding van H3T3ph op de chromosoomarmen tegenwerkt tot in de metafase en verantwoordelijk is voor de netto-defosforylering van H3T3ph aan het einde van mitose. Tijdens (pro)metafase wordt verhinderd dat PP1/Repo-Man H3T3ph in de centromeer kan defosforyleren door het tegengaan van de binding van Repo-Man aan het chromatine via fosforylering van Ser893 (S893) door Aurora B. PP2A werd geïdentificeerd als mitotische bindingspartner van Repo-Man verantwoordelijk voor de defosforylering van S893 en hierdoor wordt de binding van Repo-Man aan het chromatine hersteld en kan het Repo-Man geassocieerde PP1 H3T3ph defosforyleren. Wekunnen dus besluiten dat PP1 en PP2A gebonden aan Repo-Man samenwerken om de chromosomale targeting van Aurora B tegen te gaan. De reciproke feedback regeling van Haspin en Repo-Man door Aurora B genereert een robuuste bistabiele respons die resulteert in de targeting van het CPC naar de centromeer in prometafase.

Datum:1 jun 2009 →  28 mrt 2014
Trefwoorden:PP1, histone dephosphorylation
Disciplines:Systeembiologie
Project type:PhD project